Phương pháp đêm tè bào máu trên các thiết bị phân tích tự dộng
Phương pháp này cho phép phân tích nhiều mẫu máu trong thời gian rất ngắn. Các tê bào máu được phân loại heo một sô đặc điểm vật lý.
- Lây máu: chú ý thời gian garô không được quá lâu để tránh hiện tượng tập trung máu. Ông máu phải được trộn lắc đều.
Thời gian của mẫu máu chống đông trong dung dịch EDTA cũng có inh hưởng đến tác dụng dung giải màng bạch cầu. EDTA làm thay đổi màng bạch cẩu trong thời gian giữa' 5 - 2 0 phút, làm tăng giả thành phần những tế bào B9ẨU có kích cỡ trung bình; ngược lại khi đo cùng một mẫu máu ở thời điểm từ 1 - 5 phút sau khi lấy máu và từ 20 phút đến 4 giờ sau khi lấy máu thì kết quả như nhau. Thiet hì phan tích ẦMtyéít h ạc .tụ động: thực hiộn chủ yếu bằng phương phấp quang học hoặc phương pháp trờ kháng điện:
. Phương pháp quang học sử dụng một llậ )
- Phương pháp trờ kháng điện: trong phương pháp này, máu được pha trong dung dịch pha loãng, dung dịch này là chất dản điện tốt; các tế bào máu là những vật thể ít dẫn điện. Một dòng điện ổn định được tạo ra cho hỗn hợp dịch CÓ tế bào máu giữa hai điện cực ở hai phía của một lỗ nhỏ mà các tế bào máu cần đếm sẽ chảy qua. Mỗi một tế bào máu khi di chuyển qua lỗ nhỏ tạo nên một điộn trờ làm biến đổi dòng điộn hằng định và tạo nên một xung điộn, số lượng xung điộn tương đương với số lượng tế bào máu đã đi qua trong một khoảng thời gian nhất định. Độ lớn của mỗi xung điện tỷ lộ thuận với thể tích cùa tế bào máu (thể tích của chất điộn phân bị chiếm chỗ). Phương pháp trờ kháng điộn được sử dụng trên nhiều loại máy như Cell- Dyn, Coulter, Sysmex... Các thiết bị đều có hệ thống máy tính để tính toán và xử lý các số liộu.
- Đếm các t ế hào máu:
. Hồng cầu được đếm trong máu pha loãng với một dung dịch khồng phá hủy bạch cầu và tiểu cầu, như vậy bạch cẩu cũng được đếm cùng hổng cầu nhưng vì số lượng hồng cầu lón hơn số lượng bạch cầu rất nhiều lần (khoảng 500 lần) nên sự sai lệch về số đếm hồng cầu khi có cả bạch cầu thưởng khổng đáng kể. Sự sai lệch này chỉ cố ý nghĩa trong trường hợp s6 lượng bạch cẩu tăng vượt quá 50.000/|il. Thể tích tiểu cáu thường nhỏ nên không gây sai số khi đếm hồng cầu.
. Bach cầu được đếm trong máu được pha loãng thích hợp trong một dung dịch làm tan hồng cầu mà giữ nguyên bạch cẩu. Số lượng bạch cầu được xác định bằng tổng số các tế bào máu có thể tích trong khoáng 35 - 3-16 fl. So lượng bạch cẩu có thể tăng già do những l iêu câu bị kêt tập thành đám hoặc những hổng càu còn nhãn và n h ữ n g hồng cầu khỏng bị phá hủy hết.
- Tiểu cấu cũng được dcm t rong một dung dịch còn giữ nguyên cả hồng cầu và bạch cẩu, sô lượng tiêu câu được xác định bàng tổng sỏ các tê bào máu có thê tích Irong khoảng 2 - 2 4 fl.